XXVII Mostra Unisinos de Iniciação Científica e Tecnológica

165 XXVII MOSTRA UNISINOS DE INICIAÇÃO CIENTÍFICA E TECNOLÓGICA De 19/10/2020 a 24/10/2020 Unisinos São Leopoldo e Porto Alegre Inscrição: 2620220 - apresentação oral DESENVOLVIMENTO E ANÁLISE DE UM DISPOSITIVO PARA LISE CELULAR Autor(a): Natasha Malgarezi de Moraes Coautor(es): Samuel Maraschin e Julia Konzen Moreira. Orientador(es): Instituição: Unisinos (PIBIC/CNPq - Unisinos) Área de conhecimento: Ciências da Saúde MP em Enfermagem A lise celular é o processo de ruptura da membrana plasmática e ex- posição do material intracelular para o meio. Ela é necessária para análise de componentes intracelulares, sendo especialmente relevan- te em diversos processos de biologia molecular, onde o DNA ou RNA precisam ser extraídos da célula. Os métodos disponíveis atualmen- te no mercado, tornam a extração demorada, além de demandar vá- rios reagentes e equipamentos caros. Estes métodos podem ser diver- sos, incluindo: detergentes, ondas sonoras de alta frequência, choque térmico, entre outros. Neste trabalho, propomos a realização de um dispositivo capaz de romper a célula, expondo conteúdo intracelular, por meio de um campo elétrico ao qual a amostra é exposta, de for- ma rápida e barata. O objetivo deste projeto é desenvolver um dis- positivo microfluídico para lise celular. A metodologia da proposta utiliza, um eletrodo de alumínio impresso na impressora zebra, um molde de poliimida para formar o canal e plastificação para encapsu- lar o dispositivo. Para testar a viabilidade, e realizar a prova de con- ceito, realizaremos experimentos sangue periférico diluído em so- lução salina tamponada (PBS) corado com azul de trypan que cora células viáveis. À medida que o fluído contendo a amostra percor- re o canal onde é aplicado um sinal com tensão e frequência contro- ladas, gerando um campo elétrico que irá romper as células. Para a leitura e análises do resultado, as células são fotografadas na câma- ra de Neubauer, antes de depois da lise, as imagens são analisadas no software imageJ, onde as hemácias são contadas. Resultados pré- vios do experimento de lise apontam que em uma solução inicial de 216.800x10⁴ de hemácias foi possível observar uma média de 37% com desvio padrão de 2% de lise (n = 15). Esses achados sinalizam o